目录

1.软件功能操作说明.... 2

2.用户注册及登录.... 2

2.1登陆界面.... 2

2.2新用户注册.... 2

2.3用户登出.... 3

3.软件主界面.... 3

3.1项目创建.... 4

3.2项目预览.... 4

3.3项目修改.... 5

3.4项目移除.... 5

3.5项目导入.... 6

4.控制与显示.... 6

4.1激光器.... 7

4.2探测器.... 7

4.3样品台控制.... 7

4.4仪器信息显示.... 8

5.针孔校准界面.... 9

5.1针孔校准.... 10

5.2针孔数据的保存与导入.... 11

5.3针孔复位.... 11

6.数据采集界面.... 12

6.1校准数据采集.... 12

6.2 FCS实验数据采集.... 13

1.软件功能操作说明

数据采集软件（Correlation Acquisition）用于FCS/FCCS/smFRET实验中光路校准、样品原始荧光信号采集。

2.用户注册及登录

2.1登陆界面

软件运行后，出现登陆界面（见图2.1），可选择管理员账号或其他账号登入。（管理员用户名：adimin，密码：admin），点击“Login”进入软件主界面。

图2.1登录界面

2.2新用户注册

在软件登录界面可注册新的账户。在登录界面点击左下角“Sign up”按钮，进入用户注册界面，输入用户名和用户密码后，点击“Create account”完成用户创建。

图2.2 用户注册

2.3用户登出

点击软件主界面目录用户名，弹出按钮Sign out按钮，可退出当前用户登录。

图2.3 用户登出

3.软件主界面

图3.1为控制采集界面的Home界面，此界面可以完成项目创建、项目预览、项目修改、项目移除和项目导入。

图3.1 软件主界面

3.1项目创建

用户点击New Project下图标可创建两类项目：FCS通用项目（General）和单分子项目（Single Molecule）。点击对应图标后，用户可进行项目信息的修改，项目名称、溶剂、项目路径、项目移除（如图3.2所示）。

图3.2 项目管理

3.2项目预览

当项目历史路径存在项目时，单击项目名称可完成项目信息预览，双击项目名称可快速载入项目（如图3.3所示）。

图3.3 项目预览/加载

3.3项目修改

双击导入项目后，点击项目预览信息右上角编辑按钮（Edit），用户可进行项目信息的编辑，点击“Save”可保存项目。

图3.4 项目修改

3.4项目移除

双击导入项目后，点击项目预览信息右上角移除按钮“X” ，可将该项目从历史项目中移除，但不会删除该项目。

图3.5 项目移除

3.5项目导入

点击目录“File”，点击“Open Project”，弹出文件管理器，选择项目文件（.PrjFCS），完成项目导入（如图3.6所示）。

图3.6 项目导入

当项目历史路径存在项目时，双击项目名称可完成项目导入。

4.控制与显示

4.1 控制与项目

       如上图4.1所示红色标记，包含激光器种类、激光器功率、探测器控制、样品台控制、仪器状态显示。

4.1激光器

4.2激光器

激光器功率设置：用户可拖动滑动条或在对应激光器功率编辑框进行功率设置；

激光器控制：点击激光器复选框或激光器按钮完成激光器的打开与关闭。

4.2探测器

4.3 探测器

点击“Detector A”，打开探测器A，点击“Detector B”，打开探测器B。探测器正常打开时，显示蓝底白字，未打开时显示为黑底绿字。

4.3样品台控制

4.4 样品台

       如图4.4所示，该界面为样品台控制，点击对应按钮样品台移动到对应针孔位置。

4.5 样品台运行

       如图4.5所示，样品台运行时，控制界面弹出样品台运行信息。

4.4仪器信息显示

4.6仪器状态显示

如图4.6所示，左侧图标识仓盖闭合，此时可以进行激光器探测器控制和针孔校准和数据采集；右侧图标识仓盖打开，只可以进行样品台的控制，不可控制激光器和探测器。

图4.7 仪器状态

如图4.7所示，当数据线未正常连接仪器和电脑、仪器未打开仪器电源，则显示红色边框。

若出现上述情况，可能原因如下：

1、USB线缆未正确插入设备和电脑；

2、仪器没有打开电源。

5.针孔校准界面              

点击“Alignment”进入到针孔校准界面，出现以下三种类型界面的其中一种：

如图5.1.1所示，电脑内不存在针孔校准数据，用户需进行针孔校准后才能进行数据采集。

如图5.1.2所示，针孔数据超过预设针孔校准时间，用户需要重新校准数据才可数据采集。

如图5.1.3所示，此图代表针孔数据正常，显示针孔的相关数据，包括校准时间和针孔状态，此时用户无需进行针孔，可进行数据采集。

5.1.1 针孔校准1

5.1.2 针孔校准2

5.1.3 针孔校准3

5.1针孔校准

选择合适的激光器并设置功率后，打开激光器和探测器，点击“Start”按钮进行针孔校准，此时需要2-3分钟，针孔校准结束后如图5.2所示。

图5.2 针孔校准完成

5.2针孔数据的保存与导入

图5.3 针孔数据保存/导入

       如图5.3所示，点击“File”按钮，显示Import Alignment Data和Save Alignment Data。

点击“Import Alignment Data”可导入之前针孔校准数据，并显示控制采集界面，但导入数据不会作为当前针孔数据。

点击“Save Alignment Data”可保存当前针孔校准数据。

5.3针孔复位

图5.4 针孔复位

       如图5.4所示，在针孔校准界面（Alignment）中，点击目录“Set”按钮，弹出三个针孔复位按钮：Reset Pinhole (XY)、Reset Pinhole（AZ）、Reset Pinhole（BZ）。

当进行自动针孔校准无法正常完成时，点击复位按钮后（如图5.5），重新进行自动针孔校准。如图5.5所示，点击第一栏菜单Set按钮，界面显示如下图所示，有三个复位按钮：Reset Pinhole(XY)、Reset Pinhole(AZ)、Reset Pinhole(BZ)；XY：同时复位XY轴针孔位置，Z轴不进行复位；AZ/BZ：由于不同波段的光聚焦的焦距不同，所有AB通道的Z轴位置也会不同，AZ：A通道Z轴的复位位置，BZ：B通道Z轴的复位位置。

图5.5 针孔复位按钮

6.数据采集界面

6.1校准数据采集

6.1 校准数据采集

       如图6.1所示，点击“Calibration”按钮后，进入校准数据采集界面。

       根据实验要求打开激光器和探测器后，设置数据参数，包括荧光物质、文件名称、文件类型、溶液溶剂、采集组数、组数间隔时间、单次采集时间、单次重复次数，点击“Start”开始数据采集。

6.2 数据采集

       如图6.2所示，当数据采集完成后，数据将自动保存更新到左侧文件列表中。曲线右侧为曲线图例，用户可根据需求进行单条或多条显示，对错误数据进行筛查，完成筛查后，点击Save按钮对数据重新保存。

6.2 FCS实验数据采集

6.3 FCS实验数据采集

如图6.3所示，点击“Experiment”按钮后，进行FCS实验数据采集界面。

       采集方式分为两种：单孔数据采集、多孔数据采集，默认为单孔数据采集。

单孔数据采集：

单孔数据采集与校准数据基本一致，除了无需设置荧光物质。

多孔数据采集：

点击控制采集界面上方“Sample ?”后面“+” 可切换为多孔数据采集，点击“X”删除至一个可切换为单孔数据采集。

多孔数据采集时，可设置参数：激光器功率、激光器选择、探测器选择、孔为选择、文件名称、文件类型、溶剂类型、采集组数、组数间隔时间、单次采集时间、单次重复次数。

如下图6.4所示，根据上述描述完成批量数据参数设置，在Data Save Setting面板中会出现两个绿色按钮：Start、Auto。

点击“Start”进行多孔数据采集中单针孔的单次的数据采集，点击“Auto”按钮进行批量数据采集。

6.4 FCS 批量数据采集